HPLC Sisteminde Hayalet Pikler

Sıvı kromatografi sisteminde baseline’da gezen piklere “Hayalet Pik” denir. Bu pikler analiz sonuçlarınızı etkiler. Kromatogramlarda genel davranış tüm kromatografik profil aynıyken bu piklerin sürekli yer değiştirmesidir. Bazen tüm profil değişir ve bu piklerde değişkenlik gösterebilir. Bunun dışında yer değiştirmeden her enjeksiyonda aynı alıkonma zamanında çıkan pikler olabilir. Tüm bunları hayalet pikler olarak tanımlarız. Birçok olası sorun ve olası çözüm vardır.

Olası Nedenleri;

1- Analiz programında hata.

2- Cihaz, kolon, numune veya hareketli fazda kontaminasyon.

3- Analitlerin kolonda güçlü tutunma özelliği nedeniyle taşıma.

4- Solvent rezervuar sistemi veya inlet filtre tıkanıklığı.

5- Mikrobiyal üreme.

6- Yüksek hareketli faz pH sonucu silika yapının  bozulması.

7- Kolona bağlanmış kalıcı kontaminasyonlar.

8- Yanlış örnek ile çalışma.

 

Olası Çözümler;

1- Analiz yönteminizin doğru oluşturulduğundan emin olun.

2- Cihazı uygun yıkama prosedürüne göre yıkayın, devam ediyorsa farklı bir cihaza geçin.

3- Kolonu yıkayın, taşıma devam ediyorsa farklı bir kolona geçin.

4- Numune ve mobil fazı tekrar hazırlayın.

5- Solvent rezervuar ve inlet filtreleri yıkayın, devam ediyorsa yenileri ile değiştirin.

 

Böyle bir durumla karşılaştığınızda uygulayacağınız yöntemin önceliğini belirleyebilmek için yapmanız gereken ilk iş tüm kromatogramları incelemek ve hayalet pik olarak gözlemlediğiniz pikin davranışı ile beraber tüm kromatogram profilinizi değerlendirmektir. Bu size olası sorunları sıralama imkanı verecektir.

 

Orhan ÇAKAN