Hücre Kültürü Laboratuvarında Kontaminasyonu Önlemek
Bir hücre kültürü laboratuvarında çalışmış olan herkes kontaminasyonla karşılaşmıştır. Küçük sıkıntılardan büyük felaketlere kadar değişen kontaminasyon, kültürleri geliştirmek ve deneyleri kurmak için harcanan zaman, para ve çaba kaybına neden olur ve yanlış sonuçlara ve güvenilirlik kaybına yol açabilir.
Bunlarla birlikte kontaminasyonun hücre kültürü çalışmaları üzerinde birçok olumsuz etkisi olabilir:
Veri Yanlış Yönlendirme: Kontamine hücreler, deneysel sonuçları yanıltabilir ve istenmeyen sonuçlara yol açabilir.
Deneyimlerin Tekrarlanabilirliğini Etkileme: Kontaminasyon, deneylerin tekrarlanabilirliğini azaltabilir çünkü kontamine olmuş hücrelerin davranışı tahmin edilemez olabilir.
Yanıltıcı Sonuçlar: Kontamine hücreler, araştırmacıların gerçek verilerle yanıltıcı sonuçlar elde etmelerine neden olabilir.
Kültür Kalitesini Düşürme: Kontaminasyon, hücre kültürü ortamının genel kalitesini düşürebilir ve kültürde istenmeyen değişikliklere neden olabilir.
Bir hücre kültürü laboratuvarında kontaminasyonun kaynakları şunlar olabilir:
Hava: Hava laboratuvar ortamına giren bakteri, mantar sporları ve diğer mikroorganizmaların yayılmasına neden olabilir.
Personel: Personelin el ve giysi temizliği sağlanmazsa, hücre kültürü çalışmalarına mikrobiyal kontaminasyon kaynağı olabilirler.
Ekipman ve Malzeme: Kullanılan ekipman ve malzemeler, özellikle pipetler, petri kapları, ve medya şişeleri gibi, kontaminasyon kaynağı olabilirler.
Hücre Hatları: Kontamine hücre hatları, hücre kültürü çalışmalarında kullanılan diğer hücre hatlarını ve kültürlerini enfekte edebilir.
Medya ve Reaktifler: Kullanılan hücre kültürü medyası ve reaktifler, kontaminasyon riski taşıyabilirler.
Hücre kültürü laboratuvarlarında kontaminasyonu önlemek için iyi laboratuvar uygulamalarına (GLP) ve iyi hijyen uygulamalarına (GHP) uyulmalı, sterilizasyon teknikleri kullanılmalı ve hücre kültürü ortamının ve ekipmanının düzenli olarak kontrol edilmesi sağlanmalıdır.
Hücre Kültürü Çalışmalarınızı Kontaminasyondan Korumak İçin İpuçları;
- Çalışmanız için doğru ekipmanı seçin;
- Kontaminasyonu önlemeye yardımcı olacak tasarım özelliklerine sahip bir inkübatör seçin
- Bakır parçalar ve kaplar kontaminasyonu önlemek için daha uygundur. Bu nedenle mümkün olduğu kadar bunları tercih edin.
- HEPA filtreler ortamda bulunana partikülleri filtreleyebilir. Bu nedenle hvalandırma için mümkünse HEPA filtre kullanın.
- Doğru Aseptik Teknikleri Kullanın;
- Mümkün olduğunca kapalı kültür kapları kullanın.
- Ortamı dökmekten kaçının.
- Temiz laboratuvar önlükleri kullanın ve bunları hücre kültürü alanıyla sınırlandırın.
- Her seferinde tek bir hücre hattı ile çalışın.
- Davlumbazı günde 24 saat çalışır durumda bırakın.
- İnkübatörünüzü Temiz Tutun;
- Nem kabını, rafları, raf desteklerini ve tepsileri haftalık olarak çıkarın ve tüm paslanmaz çelik parçaları otoklavlayın.
- Dezenfektanları uygun şekilde kullanın ve taze damıtılmış suyla durulayın.
- Hazneyi dezenfektanla silin ve kurumaya bırakın.
- Tüm erişim portlarını, elektrik geçişlerini, şaft deliklerini vb. dezenfekte edin ve sensörlerin etrafını dikkatlice temizleyin.
- İyi Hijyen Uygulamalarını (GHP) Uygulayın;
- Kirli su banyoları kontaminasyon kaynağı olabilir ve aerosol üretebilir
- Atık konteynerleri ağır kontamine malzeme kaynağıdır ve davlumbazın yakınında bulunmamalıdır
- Haşere kontrolü; fareler, sıçanlar, karıncalar, hamam böcekleri, sinekler, hepsi kontaminasyon kaynağı olabilir. Laboratuvarda yiyecek veya bitki bulunması bu istenmeyen misafirleri çekebilir.
- Kişisel hijyeninize özen gösterin
- Kontaminasyonu Rutin Olarak İzleyin
- Kirlenmeyi azaltmak için belki de en iyi strateji proaktif olmak ve rutin olarak izlemektir
- Malzemeler, ortamlar, çalışma alanları ve kültürler kontaminasyon açısından rutin olarak test edilmelidir
- Antibiyotikleri Az Kullanın
- Antibiyotiklerin aşırı kullanımı kötü aseptik tekniklere ve dirence yol açabilir
- Kritik kültürlerin kaybını önlemek için antibiyotikleri yalnızca stratejik olarak kullanın